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Animais (Basileia).2022 junho; 12(12): 1488.
Publicado online em 8 de junho de 2022. doi:10.3390/ani12121488
PMCID:PMC9219509
PMID:35739826
Mandy Paterson,Editor Acadêmicoand Pablo Sánchez Quinteiro,Editor Acadêmico
Informação sobre o autor Notas do artigo Informações sobre direitos autorais e licença Isenção de responsabilidade
Dados Associados
- Materiais Suplementares
- Declaração de Disponibilidade de Dados
Abstrato
Resumo Simples
Existem muitos produtos direcionados aos donos de animais de estimação. Uma categoria desses produtos são os repelentes para cães - soluções fortemente aromatizadas projetadas para impedir que os cães se aproximem e investiguem áreas específicas; o segundo são cosméticos que devem ser agradáveis para os cães. Os cães têm um olfato particularmente sensível; portanto, cheiros fortes podem ser estímulos muito intensos e nem sempre agradáveis. É realmente interessante, então, que os produtos cosméticos caninos geralmente tenham fragrâncias muito fortes, projetadas principalmente para atrair os donos dos cães, e não os próprios cães. De fato, os aromas que os cães escolhem para colocar em seu pelo diferem fortemente dos dos cosméticos comuns. Os cães escolhem principalmente cheiros intensos derivados de animais, como fezes ou carcaças, portanto, é necessário diferenciar entre as preferências de cheiros caninos e humanos. Como existem dados científicos limitados relacionados às preferências olfativas caninas, o objetivo deste estudo foi verificar as reações dos cães a odores selecionados, que também podem ser atraentes para os humanos. Nosso estudo mostra que os cães eram mais propensos a interagir com os aromas de mirtilo, amora, menta, rosa, lavanda e linalol.
Abstrato
As evidências disponíveis sobre as preferências olfativas dos cães são bastante limitadas. O objetivo deste estudo foi verificar a resposta canina a odores selecionados que também podem ser preferidos pelos humanos. O experimento foi realizado com 14 cães adultos (10 fêmeas e 4 machos) de diferentes raças, tamanho corporal e idade (1 a 14 anos). Durante o experimento, os cães foram expostos a 33 amostras de odor: uma amostra neutra contendo dipropileno glicol puro (controle) e 32 amostras contendo dipropileno glicol e óleos de fragrância. O cão foi conduzido até a área experimental pelo seu condutor, que parou na entrada, soltou o cão e permaneceu na posição inicial. O cão explorou livremente a área por 30 s. Todos os movimentos e comportamentos dos cães foram registrados e analisados. A metodologia de observar os cães explorando livremente a área experimental permitiu determinar os cheiros que eram mais atraentes para eles (comida, roupa de castor). Nosso estudo mostra que os cães interagiram com mais frequência com os aromas de mirtilos, amoras, menta, rosa, lavanda e linalol.
Palavras-chave:cachorro, olfato, preferências olfativas, repelentes cosméticos
1. Introdução
Como o olfato desempenha um papel tão importante na vida dos cães, obter uma visão de sua percepção da comunicação olfativa é um passo importante para entender como eles experimentam o mundo. A percepção do olfato na maioria dos mamíferos é diretamente influenciada pela estrutura do próprio órgão olfativo. É composto por duas partes principais, o sistema olfativo principal e o responsável pela detecção de semioquímicos, o órgão vomeronasal (VNO), também chamado de órgão de Jacobson, cada um com vias de acesso separadas para fragrâncias [1,2,3] e comunicar com outros centros dentro do sistema nervoso central [4]. Em consequência, os sinais provenientes do sistema olfativo principal e do VNO são distintos [5]. Este fenômeno permite a detecção e reconhecimento de mais fragrâncias do que poderia ser previsto com base no número de receptores olfativos sozinhos.6].
Nos cães, o ar é direcionado para o nariz em dois fluxos separados - o fluxo respiratório e o fluxo olfativo. Durante a inalação, o ar passa pelo topo da cavidade nasal e as partículas de odor são depositadas na estrutura óssea porosa. Durante a expiração, o ar se move pela parte inferior da cavidade nasal sem perturbar as partículas de fragrância previamente depositadas [7]. O epitélio dentro do órgão olfatório principal pode ser dividido em dois tipos: o epitélio respiratório e o epitélio olfatório. A principal função do epitélio respiratório é aquecer, purificar e umedecer o ar que entra na cavidade nasal, o que é facilitado por uma camada de muco na superfície do epitélio e por células ciliadas.8]. O epitélio olfatório é de pigmentação escura e está localizado na superfície superior do corneto superior e médio e no septo nasal. É composto por células olfativas bipolares e células de suporte que lhe permitem desempenhar funções olfativas.1,9].
Levando em consideração o papel do olfato no mundo canino, é provável que os cães possam experimentar um nível muito maior de exposição a odores que podem ser reconhecidos como desagradáveis, devido ao fato de compartilharem um ambiente doméstico com seus donos. Poucos relatórios disponíveis sugerem, no entanto, que levar em consideração as preferências de odores caninos pode ser um elemento importante para enriquecer e melhorar o ambiente compartilhado pelos cães com os humanos.10]. Além disso, existem dados disponíveis que comprovam o fato de que os animais podem não apenas detectar e reconhecer o odor, mas também algumas preferências podem ser observadas com base na experiência anterior do animal [11].
Embora o sentido do olfato humano seja muito menos sensível e o olfato pareça desempenhar um papel muito menor em nossas vidas em comparação com o dos animais, e particularmente dos cães, há um número surpreendentemente alto de publicações dedicadas às preferências olfativas em humanos, em comparação com ao baixíssimo número de publicações semelhantes dedicadas a cães [12,13,14,15,16,17,18,19,20,21]. Além disso, em outras espécies, como camundongos, nas quais o olfato desempenha um papel crucial em muitos aspectos da vida, há várias publicações relacionadas ao olfato, incluindo preferências olfativas.22,23].
Parece muito importante pensar nos cheiros que, na vida normal, são impostos ao ambiente mais próximo de um cão. A atratividade desses odores, bem como as preferências individuais e gerais do cão em relação a odores em, por exemplo, cosméticos para animais, podem ter um grande impacto no bem-estar e na condição diária de um animal.
Preferência olfativa é escolher entre diferentes formas de atender a uma mesma necessidade. Baseia-se na capacidade de avaliar conjuntos de alternativas disponíveis simultaneamente que satisfaçam a mesma motivação e gravitar em direção à opção mais desejável. Uma preferência pode ser específica e referir-se à diferença na força motivacional para obter um recurso sobre outro ou outros. Assim, as preferências têm um impacto direto nas escolhas de um animal e, portanto, em suas ações. A escolha entre um recurso e outro é, portanto, uma decisão tomada com base na análise de motivações e preferências. Pode haver muitos fatores que influenciam a escolha final feita por um animal, e é por isso que determinar as preferências inequívocas dos animais na pesquisa científica pode ser um desafio.
Em testes de laboratório sobre fatores que podem influenciar o comportamento, os animais de tratamento que são expostos ao fator ou fatores de interesse são contrastados com as observações de referência. Em alguns experimentos, as observações de referência são feitas inicialmente para determinar o comportamento básico de cada animal. Após o tratamento, o animal é comparado com sua própria linha de base como referência ou controle interno. Em outros projetos experimentais, subconjuntos separados de indivíduos formam um grupo de referência ou controle que acompanha o tratamento em todos os aspectos, exceto o(s) fator(es) de interesse. As comparações subsequentes dos grupos de controle e tratamento permitem que os cientistas tirem conclusões sobre as influências no comportamento, com menos distúrbios de elementos intrínsecos e extrínsecos que podem confundir a interpretação [24].
Levando em consideração o significado do olfato canino, bem como a importância de melhorar o bem-estar animal, que parece em alguns contextos ser completamente dependente da escolha humana em relação a alguns fatores ambientais, decidimos investigar a questão da avaliação do olfato canino preferências no contexto de compostos voláteis potencialmente utilizados na produção de cosméticos para animais de estimação.
2. Materiais e métodos
2.1. Declaração ética
A pesquisa foi conduzida de acordo com os regulamentos sobre experimentação animal e diretrizes para o uso de animais em pesquisa. De acordo com a lei estatutária do país sobre experimentação animal, os procedimentos envolvendo observações de comportamentos naturais de cães em relação ao odor ou treinamento convencional de cães não são experimentação animal; a Comissão de Ética Local para Experimentação Animal (resolução nº 67/2014) afirmou que nenhuma permissão especial para o uso de cães em tais estudos não invasivos era necessária.
2.2. animais
O experimento foi realizado em 14 cães adultos (10 fêmeas e 4 machos) de diferentes raças, tamanhos corporais e idades (tabela 1). As idades dos cães variaram de 1 a 14 anos. Três dos machos e oito das fêmeas foram castrados. Todos os cães eram animais de estimação vivendo em domicílios. Os cães foram levados 1 h antes do início do teste e deixados correr livremente no jardim. Cada cão foi inscrito com seu dono e o operador e introduzido na arena de testes.
tabela 1
Cães usados em experimento.
| Cachorro | Raça | Anos de idade) | Sexo | castrado |
|---|---|---|---|---|
| D1 | Spaniel de caça polonês | 1 | F | + |
| D2 | Spaniel de caça polonês | 1 | M | + |
| D3 | Spaniel de caça polonês | 6 | F | + |
| D4 | Spaniel de caça polonês | 3 | F | + |
| D5 | Misturado | 2 | M | + |
| D6 | Misturado | 8 | F | + |
| D7 | collie barbudo | 9 | M | − |
| D8 | Terrier tibetano | 14 | M | + |
| D9 | Shih Tzu | 10 | F | − |
| D10 | Spaniel de caça polonês | 5 | F | − |
| D11 | beagle | 8 | F | + |
| D12 | beagle | 8 | F | + |
| D12 | beagle | 9 | F | + |
| Q14 | beagle | 10 | F | + |
2.3. Amostras de odor
Durante o experimento, 33 amostras de odor foram apresentadas aos cães: uma amostra neutra contendo dipropileno glicol puro (controle) e 32 amostras contendo dipropileno glicol e óleos de fragrância (mesa 2).
mesa 2
Amostras de odor usadas no experimento.
| Nº da amostra | Amostra de Odor |
|---|---|
| 1 | óleo de menta |
| 2 | amora K756 |
| 3 | acetato de isobornila |
| 4 | óleo de vetiver |
| 5 | linalol |
| 6 | citronelol |
| 7 | óleo de sálvia |
| 8 | almíscar MC4 |
| 9 | acetato de linalila |
| 10 | melão C186 |
| 11 | óleo de tangerina |
| 12 | benzaldeído |
| 13 | globalide |
| 14 | óleo de jacarandá |
| 15 | óleo de sândalo |
| 16 | óleo de laranja |
| 17 | óleo de rosa |
| 18 | óleo de limão |
| 19 | beta pineno |
| 20 | óleo de lavandina |
| 21 | morango K814 |
| 22 | eugenol |
| 23 | óleo de lavanda |
| 24 | óleo de manjericão |
| 25 | framboesa K840 |
| 26 | ambrettolide |
| 27 | beta ionona |
| 28 | mirtilo D761/G |
| 29 | óleo de gerânio AT018 |
| 30 | T almíscar |
| 31 | glicol (controle negativo) |
| 32 | comida—carne (controle positivo) |
| 33 | castóreo (controle positivo) |
O dipropileno glicol é uma matéria-prima com baixa toxicidade, tornando-se um aditivo popular para perfumes, produtos para cuidados com a pele e cabelos e como líquido usado em cigarros eletrônicos. Como também é o solvente mais comumente usado em xampus para cães, foi usado neste estudo como controle e como base para diluir óleos de fragrâncias. O dipropileno glicol tem baixa toxicidade quando tomado por via oral, através da pele ou por inalação. Não irrita a pele ou os olhos e não há evidências de que cause reações alérgicas na pele. O dipropileno glicol não é considerado cancerígeno ou genotóxico e não tem efeito sobre a fertilidade e reprodução (https://chem-distribution.nl/pl/services/glikol-dwupropilenowy-dpg/(acessado em 1 de fevereiro de 2022).
As amostras de fragrâncias foram selecionadas com base em fragrâncias atualmente usadas em xampus e repelentes e cheiros que podem ser potencialmente atraentes para cães, como frutas que os cães comem. Não houve confirmação na literatura sobre o efeito dissuasor de óleos de fragrâncias específicas. Existem relatos do suposto efeito dissuasor dos citros, mas como são bastante especulativos, isso também foi avaliado neste estudo.
As amostras de odor foram fornecidas pela Pollena Aroma Sp. z o.o. (Nowy Dwór Mazowiecki, Polônia). Todos os óleos de fragrância foram diluídos em glicol sem perfume (1:200), que é o solvente mais comum usado em cosméticos.
2.4. Design experimental
figura 1mostra o arranjo da área em que o experimento foi conduzido. A área experimental (tamanho 2,4 m × 3,6 m) foi separada do restante da sala por painéis opacos (1,8 m de altura). As 4 amostras foram dispostas em linha próximo à parede oposta à entrada, distantes 1 m uma da outra. Os swabs foram carregados por imersão na solução de odor, de modo que muito menos de 1 mL fosse apresentado ao cão. As amostras de odor foram apresentadas em cotonetes montados em bastões verticais de 20 cm de altura.
(A) Arranjo da área experimental. Os pontos azuis mostram as posições da câmera. Os quadrados vermelhos representam zonas. (B) A visão das câmeras de amostra.
Quando o adestrador entrava na área experimental com o cão, parava próximo à entrada, soltava o cão e permanecia na posição inicial. O cão caminhou livremente na área experimental por 30 s. Todos os movimentos e comportamentos dos cães foram registrados por 5 câmeras, 1 em cada ponto de amostragem e 1 para uma visão geral. Após cada tentativa, o cão foi retirado da área experimental e deixado para andar livremente na rua, antes de iniciar a próxima tentativa. A área experimental foi ventilada e lavada duas vezes com água limpa antes da introdução do próximo cão.
O método duplo-cego foi utilizado na pesquisa. O layout da amostra foi o mesmo para cada cão. Ao longo de 8 dias, todos os cães realizaram 40 tentativas (5 tentativas por dia). Em cada dia, 20 odores foram apresentados a cada cão, num total de 4 vezes (Tabela Suplementar S1). A seleção de odores apresentados em cada ensaio foi randomizada usando o Research Randomizer (https://www.randomizer.org(acessado em março de 2020). O conjunto de 4 odores apresentados em cada ensaio foi o mesmo para todos os cães. Na primeira tentativa, apenas o odor da comida foi incluído nos 4 pontos, para aumentar o interesse dos cães na área do odor.
2.5. Análises Comportamentais
Cada tentativa foi gravada da perspectiva de 5 câmeras - 1 câmera localizada acima da arena em frente ao experimentador que cobria toda a área de teste e 4 câmeras localizadas diretamente ao lado das amostras, para que a boca do animal ficasse visível durante a interação com o amostra (figura 1B). As gravações foram analisadas com o software Observer XT (Noldus Information Technology, Wageningen, Holanda). O interesse do cão por odores específicos foi explorado analisando a posição da cabeça do cão em relação ao dono e os 4 diferentes pontos de odor.
Durante a observação, na zona (1–5, verfigura 1) a ocupação (envolvimento) do animal foi avaliada com base na posição da cabeça. Para evitar viés, a pessoa que analisou os registros de vídeo dos comportamentos dos cães não conhecia as amostras específicas incluídas nos testes. Inicialmente (Estudo 1), analisamos o tempo gasto pelo cão com a cabeça na zona do condutor versus as zonas de odor. Em seguida (Estudo 2), analisamos a proporção de tempo gasto por todos os cães em cada uma das quatro zonas de odor em cada tentativa. Em seguida (Estudo 3), investigamos a preferência dos cães por odores específicos em comparação com o glicol de controle negativo, analisando a proporção de eventos em todos os ensaios em que um odor específico foi contatado ou ignorado em relação ao controle. Por fim (Estudo 4), analisamos a tendência de cada cão em usar as narinas esquerda, direita ou esquerda + direita ao se aproximar de um swab portador de odor específico. O etograma canino completo está incluído noTabela Suplementar S2. Além disso, comportamentos como lamber a amostra, abanar, pular, bocejar, espirrar, chafurdar, sacudir e lamber os lábios foram levados em consideração; no entanto, devido à natureza muito esporádica, os seguintes comportamentos não foram incluídos nas estatísticas - nenhuma correlação desses comportamentos com qualquer odor específico foi encontrada.
2.6. Métodos estatísticos
As análises estatísticas foram realizadas usando GraphPad Prism, ou em R usando o pacote lme4. Na Análise 1, as diferenças na porcentagem de tempo gasto com o manipulador versus as zonas de odores em todas as tentativas foram analisadas por ANOVA de 2 vias para medições repetidas, para investigar a influência dos fatores de tentativa versus manipulador/odores na variável de resultado percentual ; seguido por análises post-hoc de Bonferroni para analisar as diferenças em cada tentativa individual. Na Análise 2, a porcentagem de tempo gasto com cada um dos quatro odores pelos cães foi analisada usando uma ANOVA de 1 via seguida pelo teste de comparações múltiplas de Bonferroni. Os dados do estudo 1 e do estudo 2 foram distribuídos normalmente; portanto, atendendo aos critérios para análises ANOVA. Na Análise 3, um modelo misto linear generalizado foi ajustado para investigar a associação entre a atividade de farejar do cão (resultado) e os odores (covariáveis). A atividade farejadora dos cães foi dicotomizada considerando as atividades com duração superior a dois segundos como interações positivas, enquanto ausência ou interações de curta duração foram consideradas nulas. Da mesma forma, um modelo de misturador linear foi usado para testar a associação entre a duração de cheirar e os odores. Em ambos os modelos, o glicol foi usado como categoria de referência e as IDs dos cães foram introduzidas no modelo como efeito aleatório. Razões de chances (OR) com intervalos de confiança (IC) de 95% correspondentes foram calculados.
Na Análise 4, a probabilidade de usar as narinas direita, esquerda ou direita + esquerda foi avaliada para cada odor usando um modelo logit binomial para investigar a associação entre o uso da narina (resultado) e odores (covariáveis).
3. Resultados
3.1. Análise 1
Nesta parte do experimento, onde foi examinado o tempo gasto pelo cão com a cabeça na zona do condutor versus as zonas de odor, a ANOVA de duas vias para medidas repetidas mostrou um efeito significativo do condutor (F = 194,73(1,16),p< 0,0001) na posição do cão sobre o fator de tentativa, que não foi significativo. As análises post-hoc de Bonferroni mostraram que, na maioria dos ensaios, os cães passaram significativamente mais tempo na zona do manipulador, com relativamente pouco tempo explorando os zaragatoas de odor. No entanto, nos ensaios 1, 11, 16, 21, 23, 26, 31, 36 e 37, a diferença no tempo gasto entre o manipulador e as zonas de odor não foi significativa (Figura 2), indicando que os cães passaram mais tempo nas zonas de cheiro. Curiosamente, entre os odores apresentados nesses ensaios específicos, sempre esteve presente um controle positivo (odores de comida e mamona). Este resultado indica que quando um odor era de interesse, o cão passava mais tempo nas zonas de odor. Além disso, a porcentagem de tempo gasto com o condutor por cães de caça versus outras raças foi analisada por ANOVA de 2 vias, que não mostrou efeitos do fator de raça (F = 1,37(1385),p= 0,24) e um efeito significativo do ensaio na variável de resultado percentual (F = 4,64(39,85),p< 0,0001). Da mesma forma, não houve efeitos significativos do sexo dos cães na porcentagem de tempo gasto com o condutor ou nas zonas de odor.
Porcentagem de tempo gasto pelo cão com a cabeça dentro do condutor vs. áreas de amostragem. Porcentagem de tempo gasto pelo cão com a cabeça dentro do condutor vs. a área de amostras em cada tentativa. As diferenças foram estatisticamente significativas em todas as tentativas, exceto nas tentativas 1, 11, 16, 20, 23, 26, 31, 36 e 37, nas quais a diferença entre o tempo gasto com o manipulador versus o tempo gasto com as amostras não foi significativa.
3.2. Análise 2
Análises da porcentagem de tempo gasto por todos os cães em cada uma das quatro zonas de odor nas tentativas individuais mostraram que houve poucas diferenças entre os quatro cheiros em cada tentativa (Figura 3). Em particular, o odor de comida sempre foi preferido pelos cães sobre os outros cheiros apresentados no mesmo ensaio. Além disso, os odores de tangerina e framboesa foram significativamente mais explorados nos ensaios 23 e 33, respectivamente, em comparação com outros odores apresentados no mesmo ensaio (Figura 3). Nestes dois ensaios, os cães de caça apresentaram níveis de exploração semelhantes em comparação com as outras raças.
3.3. Análise 3
A posição do cão em relação a um odor específico ou zona do condutor é um indicador do interesse do cão; no entanto, não revela se o cão está cheirando ativamente os zaragatoas de odor. Portanto, uma análise mais precisa do comportamento do cão ao se aproximar dos swabs foi realizada pela observação direta da atividade farejadora dos cães e sua duração. Primeiro, todos os ensaios foram analisados usando um modelo misto linear generalizado para investigar quais odores tinham maior probabilidade de serem cheirados pelos cães em comparação com o glicol de controle (Tabela 3). Uma interação positiva foi considerada quando a duração do sniffing foi superior a 2 s. Este modelo revelou que os controles positivos, comida e castoreum, tiveram a maior probabilidade de serem contatados e cheirados, enquanto o óleo de laranja teve uma probabilidade significativamente maior de ser cheirado em comparação com o glicol, embora em menor grau em relação aos controles positivos. Além disso, o acetato de linalila foi explorado com menor frequência em relação ao glicol. Tais tendências de preferência eram verdadeiras mesmo levando em consideração a identificação do cão como um fator aleatório. Além disso, para investigar quais odores tinham a maior probabilidade de serem cheirados por um período de tempo mais longo, o conjunto de dados foi primeiro filtrado para remover todas as interações em que a duração do cheiro foi inferior a 2 s, e um modelo linear misto foi executado para explorar cujos odores provocam uma interação mais duradoura em comparação com o glicol de controle negativo (Tabela 4). A maior probabilidade de exibir uma cheirada durável foi encontrada para óleo de limão e ambrettolide, enquanto outros odores (por exemplo, acetato de isobornila, acetato de linalila, globalide, beta pineno, óleo de manjericão e beta ionona) ainda estavam despertando interações significativamente mais longas em comparação com o controlar o glicol, mas em menor grau. Curiosamente, esta análise mostrou que os controles positivos, comida e castoreum, não foram significativamente associados com sniffing durável em comparação com o glicol.
Tabela 3
Interação positiva dos cães - atividade de farejar (Sim/Não): modelo linear misto generalizado exibindo associações entre atividade de farejar (resultado) e odores administrados (covariáveis), com IDs de cães como fator aleatório e glicol como categoria de referência.
| Interação positiva dos cães | |||
|---|---|---|---|
| Preditores | Razões de chances | IC | p |
| (Interceptar) | 0,58 | 0,39–0,86 | 0,007 |
| Óleo de menta | 1,72 | 0,90–3,27 | 0,098 |
| Blackberry K756 | 0,91 | 0,47–1,77 | 0,779 |
| acetato de isobornila | 1,00 | 0,52–1,93 | 1.000 |
| óleo de vetiver | 0,62 | 0,31–1,26 | 0,188 |
| linalol | 1,00 | 0,52–1,93 | 1.000 |
| citronelol | 1,00 | 0,52–1,93 | 1.000 |
| óleo de salva | 1.44 | 0,76–2,74 | 0,267 |
| Almíscar MC4 | 0,80 | 0,41–1,56 | 0,511 |
| acetato de linalila | 0,42 | 0,20–0,90 | 0,026 |
| Melão C186 | 0,82 | 0,39–1,76 | 0,620 |
| óleo de tangerina | 0,89 | 0,49–1,64 | 0,712 |
| benzaldeído | 0,67 | 0,34–1,34 | 0,261 |
| Globalide | 0,54 | 0,26–1,11 | 0,092 |
| óleo de jacarandá | 0,91 | 0,47–1,77 | 0,779 |
| óleo de sândalo | 0,75 | 0,38–1,47 | 0,399 |
| óleo de laranja | 2.46 | 1,28–4,70 | 0,007 |
| óleo de rosa | 1,57 | 0,83–2,99 | 0,167 |
| óleo de limão | 0,67 | 0,34–1,34 | 0,261 |
| beta pineno | 0,82 | 0,42–1,62 | 0,575 |
| óleo de lavandina | 0,75 | 0,38–1,47 | 0,399 |
| Morango K814 | 1,57 | 0,83–2,99 | 0,167 |
| eugenol | 0,82 | 0,42–1,62 | 0,575 |
| Óleo de lavanda | 1.10 | 0,57–2,11 | 0,780 |
| óleo de manjericão | 0,91 | 0,47–1,77 | 0,779 |
| Framboesa K840 | 1.53 | 0,74–3,16 | 0,252 |
| Ambrettolide | 1.20 | 0,67–2,18 | 0,541 |
| beta ionona | 0,91 | 0,47–1,77 | 0,779 |
| Mirtilo D761/G | 0,94 | 0,44–1,98 | 0,869 |
| Óleo de gerânio AT018 | 0,54 | 0,26–1,11 | 0,092 |
| T almíscar | 0,96 | 0,53–1,76 | 0,902 |
| Comida de carne | 3,45 | 2.31–5.16 | <0,001 |
| Castor | 6.17 | 2.63–14.47 | <0,001 |
| efeitos aleatórios | |||
| p2 | 3.29 | ||
| t00 cachorro | 0,26 | ||
| ICC | 0,07 | ||
| NCachorro | 12 | ||
| Observações | 1920 | ||
| Marginal R2/Condicional R2 | 0,082/0,149 | ||
Tabela 4
Atividade de cheirar (duração): modelo linear misto exibindo associações entre a duração da atividade de farejar (resultado) e odores administrados (covariáveis), com IDs de cães como fator aleatório e glicol como categoria de referência.
| Tempo | |||
|---|---|---|---|
| Preditores | estimativas | IC | p |
| (Interceptar) | 3.05 | 2.42–3.69 | <0,001 |
| Óleo de menta | −0,42 | −1,51–0,67 | 0,452 |
| Blackberry K756 | 0,14 | −1,23–1,50 | 0,843 |
| acetato de isobornila | 1,55 | 0,26–2,84 | 0,019 |
| óleo de vetiver | 0,51 | −0,75–1,76 | 0,428 |
| linalol | 0,59 | −0,74–1,92 | 0,385 |
| citronelol | 0,52 | −0,59–1,63 | 0,362 |
| óleo de salva | 0,23 | −1,06–1,52 | 0,724 |
| Almíscar MC4 | 0,28 | −0,92–1,48 | 0,646 |
| acetato de linalila | 1,60 | 0,34–2,85 | 0,013 |
| Melão C186 | 0,86 | −0,40–2,12 | 0,180 |
| óleo de tangerina | 0,44 | −0,63–1,52 | 0,420 |
| benzaldeído | 0,41 | −1,05–1,87 | 0,585 |
| Globalide | 13h30 | 0,04–2,56 | 0,043 |
| óleo de jacarandá | 0,80 | −0,61–2,22 | 0,266 |
| óleo de sândalo | 0,81 | −0,66–2,28 | 0,278 |
| óleo de laranja | 1.22 | −0,01–2,45 | 0,052 |
| óleo de rosa | 0,69 | −0,44–1,82 | 0,230 |
| óleo de limão | 1,91 | 1.26–2.56 | <0,001 |
| beta pineno | 1.61 | 0,57–2,65 | 0,002 |
| óleo de lavandina | 0,39 | −1,03–1,80 | 0,593 |
| Morango K814 | 0,72 | −0,50–1,95 | 0,249 |
| eugenol | −0,40 | −1,62–0,83 | 0,526 |
| Óleo de lavanda | 0,58 | −0,57–1,73 | 0,323 |
| óleo de manjericão | 1.43 | 0,30–2,56 | 0,013 |
| Framboesa K840 | 0,49 | −0,80–1,78 | 0,460 |
| Ambrettolide | 2.88 | 1.29–4.47 | <0,001 |
| beta ionona | 1,49 | 0,13–2,86 | 0,032 |
| Mirtilo D761/G | −0,01 | −1,47–1,45 | 0,986 |
| Óleo de gerânio AT018 | 0,84 | −0,42–2,10 | 0,189 |
| T almíscar | 0,86 | −0,47–2,18 | 0,205 |
| Comida de carne | 0,17 | −0,86–1,19 | 0,750 |
| Castor | −0,31 | −1,42–0,80 | 0,581 |
| efeitos aleatórios | |||
| p2 | 5.83 | ||
| t00 cachorro | 0,46 | ||
| ICC | 0,07 | ||
| NCachorro | 12 | ||
| Observações | 775 | ||
| Marginal R2/Condicional R2 | 0,087/0,154 | ||
3.4. Análise 4
Os resultados das análises da tendência do cão em usar as narinas esquerda, direita ou esquerda + direita ao se aproximar de um determinado odor revelaram maior probabilidade de usar a narina esquerda ou esquerda + direita, e raramente usar a única narina direita, quando os cães encontraram óleo de lavandina, mesmo depois de corrigir a variabilidade de cães individuais como um efeito aleatório.
4. Discussão
Parece muito importante considerar os cheiros que, na vida normal, fazem parte do ambiente mais próximo de um cão. A atratividade desses cheiros e as preferências individuais e gerais dos cães de acordo com diferentes cheiros em, por exemplo, cosméticos para animais, podem ter um enorme impacto no bem-estar e na condição cotidiana dos animais.
Muitos estudos apontam para o desenvolvimento precoce das estruturas olfativas e seu impacto na interação de um indivíduo com seu ambiente; assim, ao mesmo tempo, a questão das preferências olfativas pode surgir já no período fetal [25,26,27,28]. No entanto, a pesquisa sobre as preferências olfativas dos cães é muito limitada. Na indústria de animais de estimação, o banco de dados concentra-se nos métodos usados para determinar a aceitação ou preferência alimentar dos animais de estimação. Apesar da atratividade de um odor alimentar, alguns estudos têm focado nas preferências de odor em indivíduos em termos de saúde ou doença em várias espécies.29], fases do ciclo sexual [13,30,31], ou mesmo a influência de traços de personalidade específicos nas preferências olfativas [32,33,34]. Vale ressaltar que o odor corporal que pode influenciar a percepção de um indivíduo pode mudar em conexão com a doença [35,36,37,38], estados emocionais [39], dieta ou alterações hormonais [40,41,42].
Em estudos sobre a comunicação e habilidades cognitivas de cães em um contexto social, muito mais ênfase tem sido colocada na análise da comunicação visual.43,44,45,46,47,48,49,50,51] do que habilidades olfativas [52]. Não sabemos exatamente com que intensidade os cães baseiam sua orientação no ambiente em pistas olfativas, mas temos convicção sobre as enormes possibilidades de perceber o olfato de um cão [53].
Os animais podem ser motivados a interagir ou evitar interagir com um determinado estímulo. Motivações positivas e negativas são inferidas a partir do comportamento, por exemplo, de abordagem-comportamento vs. evitação, respectivamente [54]. Indivíduos de uma espécie podem diferir na força de sua motivação para estímulos específicos. Essas diferenças são explicadas por muitos fatores, desde sexo, genes e idade até o ambiente de desenvolvimento ou a experiência adquirida pelo indivíduo. A motivação geralmente é influenciada por muitos fatores que podem ser intrínsecos (por exemplo, genéticos ou fisiológicos) ou extrínsecos (ou seja, no ambiente do animal), por exemplo, a motivação para beber (sede) pode ser aumentada por hormônios responsáveis pelo controle da água do corpo equilíbrio, mas também é reforçada pela visão da água [24].
É difícil avaliar testes de preferência em animais cativos ou nascidos na natureza porque não é certo que o mesmo animal ainda teria a mesma escolha sem mudanças ambientais tão significativas. Esse é um problema muito comum na hora de escolher entre diversos recursos para realização de exames laboratoriais. Em nosso estudo, esse fato também deveria ter sido levado em consideração – o fato de um animal selecionar um determinado cheiro em condições de laboratório ainda não é uma confirmação científica de que em condições naturais ele ainda escolheria aquele cheiro. Embora os resultados do nosso estudo indiquem que os cães passam mais tempo perto de amostras de plantas comestíveis (como bagas), é de salientar que a escolha do aroma em si não tem de estar relacionada com o facto de o animal querer ter tal perfume em sua pele. No entanto, embora o teste de preferência de fragrância, especialmente em relação a cosméticos para animais, ainda seja um campo de pesquisa incipiente, deve-se lembrar que forçar um animal a usar um perfume que considera menos desagradável pode ter um impacto menos negativo em seu bem-estar, do que forçá-lo a usar um perfume que os animais evitam, mesmo em condições de laboratório.
Procurou-se escolher uma metodologia que fosse o mais natural possível para observação de exploração livre, sem influência humana, ainda na presença de um condutor, para que o cão se sentisse seguro. Foi aplicado um teste duplo-cego: o cão e o condutor não sabiam que tipo de amostras de odor foram usadas em cada tentativa. Os testes laboratoriais de preferência geralmente se baseiam em apresentar ao animal vários estímulos possíveis e determinar a frequência da escolha feita. Em nossa pesquisa, além da latência, tempo de inalação e frequência de seleção da amostra, também analisamos outros comportamentos que são adotados como comportamentos afiliados (relacionados à busca do objeto, interesse, sensação de prazer, comportamentos relacionados a uma análise detalhada de olfato, como: saborear, esfregar, babar, lamber) e comportamento estressante (reação de evitação, espirro). Em seguida, quando o comportamento de escolha do animal revela a opção preferida ou evitada no experimento, o cientista pode prosseguir para determinar a força de sua preferência comportamental. Esses testes são denominados testes de preferência.
Nossos resultados mostrando maior tempo gasto pelos cães na zona de alguns odores confirmaram que alguns deles despertaram mais interesse do que outros. Além disso, no caso da lavanda, o aumento das proporções de uso das narinas esquerda e esquerda + direita pode sugerir que esse odor pode ser reconhecido pelos cães não apenas como interessante, mas também agradável [55,56]. Além do odor de comida, alguns outros odores menos óbvios, como mirtilo, hortelã-pimenta, mamona, tangerina e rosa, também foram considerados interessantes. O interesse dos animais, em particular das plantas, pode ser de alguma forma explicado pela sua utilidade, por exemplo, no processo de autocura, ou na proteção contra parasitas. Existem dezenas de exemplos desse tipo de prática descritos em muitas espécies (mamíferos, répteis e aves); entretanto, não temos conhecimento de exemplos desse tipo de comportamento observado em cães domésticos. Isso pode ser explicado pelas limitadas possibilidades de apresentar esse tipo de comportamento nesta espécie [57]. Nosso estudo mostra que o cheiro de comida e o cheiro de roupas de castor são atraentes para os cães. Os animais exploraram com mais frequência os controlos positivos com estas amostras (89,19% tempo de contacto para vestuário de castor e 87,44% com amostras de comida), também se lambendo e notando-se o claro interesse dos cães por estas amostras (as lambidas das amostras só aconteciam com os controlos positivos, no entanto, apenas alguns cães realizaram esse comportamento esporadicamente, o que não é estatisticamente significativo). Os outros cheiros no estudo podem, portanto, ser comparados às interações com as amostras de controle.
Descobrimos que os cães eram mais propensos a interagir com o cheiro de lavanda, então pode-se presumir que esse cheiro não é desagradável ou repelente para eles. Foi comprovado que a lavanda afeta uma variedade de espécies (incluindo cães e humanos), com o cheiro de lavanda mostrado para diminuir a frequência cardíaca dos cães, possivelmente afetando a atividade vagal, bem como aumentando o descanso e o tempo sentado enquanto anda em um carro [58,59]. Resultados semelhantes também foram obtidos em um estudo de abrigo – cães expostos ao cheiro de lavanda ficaram mais calmos. Resultados semelhantes foram alcançados com a fragrância de camomila. Por outro lado, a hortelã-pimenta e o alecrim tiveram efeitos estimulantes nos cães, que tendiam a ficar mais agitados e a passar menos tempo descansando quando expostos a essas fragrâncias.10].
O cheiro de lavanda também pode afetar o estado emocional do ser humano, reduzindo os efeitos do estresse oxidativo e diminuindo os níveis de cortisol [60]. Cheirar lavanda e alecrim aumenta a atividade de eliminação de radicais livres e diminui o nível de cortisol na saliva.61].
O olfato em cães não é apenas um sentido altamente desenvolvido, mas também desempenha um papel importante no bem-estar do animal. O cheiro também pode ser combinado com as preferências individuais do animal [62], que por sua vez pode ser modulada por experiências anteriores. A capacidade dos odores de evocar memórias passadas foi demonstrada em humanos, assim como em cães.63,64,65]. A capacidade dos odores de evocar memórias emocionais foi demonstrada em pessoas que sofrem de transtorno de estresse pós-traumático (TEPT). Ainda é uma questão em aberto se um mecanismo semelhante está presente em cães no contexto de memórias de prazer e desprazer. Esses exemplos mostram que a seleção da fragrância deve ser feita com cuidado e que os produtos cosméticos para cães disponíveis comercialmente devem ter uma composição variada para que o proprietário (e, indiretamente, seu cão) tenha uma escolha.
Embora os cheiros particulares avaliados em nosso estudo, e especialmente aqueles considerados mais interessantes para cães, devessem ser neutros para os cães no contexto de sua experiência anterior, vale a pena mencionar que a introdução adequada (suave e sem estresse) pode ser uma questão muito importante, pois o estresse gerado durante a primeira exposição ao cheiro (por exemplo, primeiro banho) pode criar uma associação negativa, que destruiria a recepção positiva ao cheiro postulada neste estudo. A associação de um determinado perfume com algumas emoções pode influenciar a percepção do cheiro.
Outra questão que poderia ser discutida no contexto do uso de cosméticos em cães, além da atratividade, é sua influência no auto-reconhecimento. No estudo de Horowitz relacionado a essa questão, os autores concluíram que os cães mostram mais interesse investigativo em seus próprios odores quando modificados [66]. Como mencionado anteriormente, os animais têm uma tendência natural de modificar seu próprio cheiro, o que pode ser usado como uma camuflagem de cheiro natural, mas também pode ser causado pelo desejo de obter um efeito repelente [67].
O efeito de um cheiro no comportamento de um animal de estimação não é a única maneira de determinar suas possíveis preferências ou distinguir entre os efeitos positivos ou negativos de um determinado odor em um cão. A intensa cheirada da amostra com lambidas, observada em nosso estudo no caso de amostras de comida e roupas de castor, também pode ser considerada um indicador de maior interesse e associações positivas que o animal tem com o odor da amostra. Comportamentos semelhantes ocorreram na interação com outros odores, como lavanda, rosa e mirtilo.
O cheiro também pode ser tratado como um enriquecimento do ambiente, incentivando interações ainda mais frequentes com brinquedos por cães em um abrigo [68]. O enriquecimento do ambiente é uma das principais ferramentas para melhorar o bem-estar dos animais em cativeiro, embora para atingir este objetivo, o enriquecimento deve ser importante e agradável para o animal. Uma vez que os odores demonstraram afetar o humor humano [20], pode-se levar em consideração também que os cães, para quem o olfato é muito mais importante do que para o humano, também podem ser influenciados dessa forma.
Como percebemos que entre outros o cheiro de rosa parecia ser interessante (e possivelmente agradável) para os cães, ficamos curiosos sobre o sentido biológico e a explicação prática para esse tipo de preferência. No entanto, neste contexto, vale a pena mencionar que as mesmas fragrâncias ou semelhantes podem ter origens muito diferentes [69]. Em muitos casos, animais, incluindo mamíferos, contribuem significativamente para a polinização, servindo como vetores para a transferência de pólen.70]. Além disso, o cheiro reconhecido como cheiro de rosa, levando em consideração que geralmente tem mais de um componente, pode ser sentido de maneira muito diferente pelos cães, que podem detectar outro componente como dominante [70].
A configuração experimental incluiu dois tipos de amostras positivas (salsicha-comida e castóreo) para validar o experimento. Ambos eram cheiros de certa atratividade e acabaram sendo os odores preferidos pelos cães, o que confirma a correção do desenho experimental.
Outras fragrâncias que se mostraram altamente atraentes para cães e sua seleção e foram estatisticamente significativamente mais frequentes do que outras amostras foram: 1. Hortelã-pimenta; 2. Rosa; e 3. Mirtilo.
Não há pesquisas científicas sobre as preferências dos cães por esses cheiros, mas podemos encontrar relatos sobre as reações dos lobos a algumas fragrâncias. Por exemplo, no livro: “A verdade sobre lobos e cães” escrito por Toni Shelbourne [71], podemos encontrar a frase: Cheiros fortes como perfume, amaciante ou menta podem superestimular os lobos e se uma hortelã-pimenta for comida antes da interação com eles, eles vão lamber sua boca ou lamber seu queixo.
No entanto, não há nenhuma fonte dada para esta afirmação ou base científica; portanto, deve ser tratado como uma fonte anedótica. O único relatório científico sobre hortelã-pimenta foi no experimento em um abrigo, onde a difusão de alecrim e hortelã-pimenta no ambiente de um cão encorajou significativamente mais pé, movimento e vocalização do que outros tipos de odores [10].
No entanto, esses relatórios não analisam a atratividade ou aversão a essa fragrância.
O perfume da própria menta foi escolhido pelo autor. Ela notou que muitos de seus cachorros e cachorros de clientes comem a hortelã plantada em suas hortas.
A escolha lógica do cachorro foram os aromas de mirtilo e rosa silvestre (rosa caninaL.) (também conhecida como rosa canina). O autor, ao escolher essas fragrâncias, foi guiado por relatos de que os lobos comem os frutos dessas plantas para complementar sua dieta [72,73]. Os cães também ficam felizes em se curar comendo essas frutas. Os frutos da rosa canina são um componente muito popular da dieta BARF, e podemos comprar muitos suplementos para cães com essas frutas (por exemplo, cão de caça BARFER Rose Hip). Nossa pesquisa confirmou a atratividade de seu perfume.
Houve também alguns odores totalmente neutros para cães ou que os cães evitam com significância estatística, como o acetato de linalila. Um fato interessante é que o citronelol tem para os humanos um cheiro de rosa, e o gerânio tem um cheiro de menta rosa, o globalide é uma imitação do cheiro de almíscar. No entanto, o nariz humano é muito mais fácil de enganar do que o olfato de um cachorro.
5. Conclusões
Nosso estudo mostra que os cães eram mais propensos a interagir com os cheiros de mirtilo, amora, menta, rosa, lavanda e linalol, então pode-se presumir que esses cheiros não eram desagradáveis ou evitáveis para eles. A metodologia de observar cães explorando livremente os locais de pesquisa permite determinar os odores que mais os atraem (comida, roupas de castor). Mais estudos parecem ser necessários no contexto da importância da intensidade dos cheiros usados na produção de cosméticos (diferenças nos limiares de detecção de cheiros de humanos e cães) e a duração da persistência dos cheiros na pelagem dos animais. A prevalência de preferências dependentes do sexo em relação a aromas específicos também pode ser digna de investigação.
Agradecimentos
Agradecemos ao Laboratório DermaPharm pelo apoio logístico e consultas substantivas na tecnologia de preparação de xampus para cães. Agradecemos também a Pollena Aroma Sp. z o.o. por fornecer as amostras de odor que foram usadas durante o experimento.
Materiais Suplementares
As seguintes informações de suporte podem ser baixadas em:https://www.mdpi.com/article/10.3390/ani12121488/s1, Tabela S1. Disposição de amostras. Tabela S2. Etograma do cão.
Declaração de Financiamento
Este estudo foi financiado pela Fundação do Dr. Seidel e foi apoiado financeiramente pelos fundos de atividades de desenvolvimento atribuídos à Faculdade de Medicina Veterinária, Wrocław University of Environmental and Life Sciences, Polônia. O APC/BPC é cofinanciado pela Wroclaw University of Environmental and Life Sciences e pela University of Life Sciences em Lublin.
Contribuições do autor
Conceitualização, A.K. e M.W.; análise formal, S.S., M.D., J.K. e I.R.-R.; investigação, A.K., M.W., M.Z., A.S. e J.K.; supervisão, I.R.-R.; visualização, A.K. e M.W.; redação - rascunho original, A.K., M.W. e M.D. Todos os autores leram e concordaram com a versão publicada do manuscrito.
Declaração do Conselho de Revisão Institucional
De acordo com a lei estatutária do país sobre experimentação animal, os procedimentos envolvendo observações de comportamentos naturais de cães em relação ao odor ou treinamento convencional de cães não são experimentação animal; a Comissão de Ética Local para Experimentação Animal (resolução nº 67/2014) afirmou que nenhuma permissão especial para o uso de cães em tais estudos não invasivos era necessária.
Declaração de Disponibilidade de Dados
Os dados que apóiam as descobertas deste estudo estão disponíveis com o autor correspondente (A.K.), mediante solicitação razoável.
Conflitos de interesse
Os autores declaram que não existem interesses concorrentes.
notas de rodapé
Nota do editor:O MDPI permanece neutro em relação a reivindicações jurisdicionais em mapas publicados e afiliações institucionais.
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Artigos deAnimais: um periódico de acesso aberto do MDPIsão fornecidos aqui cortesia deInstituto Multidisciplinar de Publicações Digitais (MDPI)
